通用蛋白质生物素化试剂盒NovoBiotinylation Kit (PE014)

目录 规格 价格
产品描述:

Biotin-Avidin相互作用常用于蛋白质检测及蛋白质纯化。当目标蛋白含有生物素化受体蛋白位点如Avi标签时,可选用Novoprotein蛋白质特异性生物素化试剂盒(AviBiotinylation Kit, PE004)。NovoBitinylation Kit 第一次实现了酶法非生物素受体蛋白的生物素化,反应条件温和,特异性修饰蛋白质上的赖氨酸,反应特异性高。

产品用途:

任意含赖氨酸蛋白质生物素标记,用于亲和纯化、基于Biotin-Avidin/Streptavidin的检测如BIAcore传感片SA的亲和力检测等。由于酶法修饰条件温和,对靶分子的影响小。

产品特点:

反应条件温和,是目前市场上唯一酶法Biotin化试剂盒。通用性高,适用于任意含赖氨酸的蛋白质。操作简便,纯化或未经纯化的蛋白质加入相应的试剂后30度保温即可。

产品常用缓冲体系:
总体积25μl,于30℃孵育30~60min使底物充分生物素化。
反应物组成 体积
10×NovoBiotinylation Buffer A 2.5 μl
10×NovoBiotinylation Buffer B 2.5 μl
NovoBiotinylation 酶 1.5 μl
蛋白(多肽)底物 (1nmol) 18.5μl
使用建议:

氯化钠(>100 mM)、甘油(>5% W/V)、硫酸铵(>50 mM)等许多常见的缓冲液成分会抑制生物素连接酶的活性。当底物蛋白(多肽)确有必要使用这些试剂时,应尽量降低浓度。本产品的生物素连接酶经严格质量控制,没有蛋白酶活性。如果用于生物素化的底物蛋白是未经纯化的粗提蛋白,建议加入适量的蛋白酶抑制剂,以防止在生物素化的过程中发生降解。

产品包装:
NovoBiotinylation酶 (750 U/ μl) 100μl
D-Biotin 1ml
10×NovoBiotinylation Buffer A 1ml
10×NovoBiotinylation Buffer B 1ml
活性定义:
底物蛋白(多肽)浓度为38μM的条件下,于30℃ 孵育30 min,将1pmol蛋白(多肽)生物素化所需的酶量定义为一个活性单位。
质量保证:
生物素连接酶通过离子交换、疏水层析等多步纯化,纯度大于95%,无蛋白酶与其它酶活性残余。
产品各缓冲液组成:
NovoBiotinylation酶储存缓冲液:50mM Imidazole, 50mM NaCl, 5% Glycerol, 5mM Mercaptoethanol, pH 6.8
10×NovoBiotinylation Buffer A:0.5M Bicine,pH 8.3
10×NovoBiotinylation Buffer B:100mM ATP,100mM MgOAc,500μM D-Biotin
D-Biotin:500μM D-Biotin
储存条件:
干冰运送,解冻后分装,避免反复冻融。长期保存置于-80℃,短期内使用置于-20℃,频繁使用可短时置于4℃。在4℃条件下保存三个月可保持>90%的酶活性。10×NovoBiotinylation Buffer A、B和D-Biotin储存于-20℃,可反复冻融。
相关产品:
V104 pNovoAvi
V207 BirA/BL21(DE3)
For research use ONLY.