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Endo H糖苷内切酶 (PE017)

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产品描述:

糖苷内切酶H是一种重组糖苷酶,能够对N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的壳二糖核心结构进行切割。本制品克隆自褶皱。链霉菌(streptomyces plicatus)并在E.coli中重组表达,多步纯化获得。

产品用途:

去除糖蛋白中的N-连接高甘露糖

切割位点:

Endo H 仅切割高甘露糖型结构(n=2-150,x=(Man)1-2,y=H) 和杂合型结构 (n=2,x和/或y=AcNeu-Gal-GlcNAc)

反应条件:

将1×糖蛋白在糖蛋白变性缓冲液(含0.5%SDS,40mM DTT)中100℃煮沸10分钟使其变性;再在1×反应缓冲液(50mM 柠檬酸钠pH 5.5 储存于 25℃)中于37℃温育。

注意事项:

酶活性不受SDS影响。要使天然糖蛋白去糖基化,或许需要增加酶量并 延长温育时间。

产品包装:
ENDOH(5000U/μl)20μl
10×糖蛋白变性缓冲液1ml
10×ENDOH反应缓冲液1ml
质量保证:
无外切糖苷酶污染,无蛋白水解活性。
活性定义:
10μl的反应体系中,37℃条件下,1小时从10μg变性 RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需的酶量。
缓冲液配方
10×糖蛋白变性缓冲液:5% SDS,400mM DTT
10×ENDOH反应缓冲液:500mM 柠檬酸钠 pH5.5储存于25℃。
保存条件:
20mM Tris, 50mM NaCl, 5mM EDTA pH7.5, -20度保存。
For research use ONLY.