产品描述：
NovoGlyc糖苷内切酶（endoglycosidase）是一种高特异性糖苷内切酶，可以特异性水解去除抗体Fc片段上的N型糖链，酶活受到高甘露糖和半聚糖的抑制。酶切反应的最佳pH值为7.4，最佳反应温度为37℃。许多反应缓冲液的pH值处在6-8之间，建议客户针对不同的蛋白提前进行预实验，以确定最佳反应条件。NovoGlyc 糖苷内切酶带有His标签，易于从反应中去除。
NovoGlyc 糖苷内切酶反应缓冲液的最适pH值为6.0-8.0（表一）。
活性定义：
在10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl,pH 7.4反应体系内，37℃反应1小时，一个单位的酶能将1μg的人源IgG切割95%以上。
制剂与储存：
- 酶活性20 U/μl,在10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl，pH 7.4的溶液中经0.2μm无菌滤膜过滤后冻干。
- -20℃保存，溶解后在4-8℃条件下可存放一个月。
- 低温冰袋运输。
溶解：
- 溶解前低速离心，使冻干粉末聚集于管底。
- 用无菌ddH2O溶解，1000U酶加入50μl无菌ddH2O，5000U酶加入250μl无菌ddH2O，配制成为酶活性为20U/μl的溶液。
- 低速离心，使溶液汇聚于管底。
质量控制：
The activity of NovoGlyc endoglycosidases on mAb.
mAb经NovoGlyc去糖基化（37度30分钟）并经FabCutter II加工为Fc和F(ab′)₂ 非还原电泳检测结果显示，Fc片段糖基化已经去除（泳道3，右下）。
1: mAb; 2: mAb+FabCutter II; 3: mAb+FabCutter II +NovoGlyc; M: Protein Marker
1: mAb; 2: mAb+FabCutter II; 3: mAb+FabCutter II +NovoGlyc; M: Protein Marker
表一、可供选择的反应缓冲液及pH
| Compatible Buffers | pH |
| Phosphate Buffered Saline(PBS) | 6.5-8.0 |
| Tris Buffer | 7.0-8.0 |
| Sodium Acetate Buffer | 6.5* |
| *pH在6.0以下，需要增加酶的用量。 | |
操作方法：
- 按照溶解说明将冻干粉溶解，配制成为20U/μl的溶液。
- 待酶切的抗体溶解在反应缓冲液里，建议浓度为0.5-10mg/ml。
- 按照1U酶切1μg IgG的量将酶加到反应缓冲液里，通常在中性的条件下。
- 37℃酶切1小时，取部分样品跑SDS-PAGE检测切割效果。
*可使用本kit中的Human IgG抗体做为底物测试酶切效果，用70μl ddH2O配制成1mg/ml的蛋白溶解，取50μl加入1μl的酶。酶切前后取样跑SDS-PAGE。