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PNGase F糖苷内切酶 (PE011)

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产品描述:

肽N-糖苷酶F,即PNGase F,可以在N-连接糖蛋白的高甘露糖、杂合和复合寡糖部分最内侧的N-乙酰葡糖糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间进行切割。PNGase F从携带有脑膜败血性黄杆菌PNGase基因的重组大肠杆菌中多步纯化获得。

切割位点:

PNGase F几乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有N-连接糖 (x = H 或寡糖) 。

反应条件:

将1×糖蛋白于糖蛋白变性缓冲液(含0.5%SDS,40mM DTT)中100℃ 煮沸10分钟使其变性,再加入1%NP-40的1×反应缓冲液(50mM磷酸钠 pH7.5储存于25℃)中37℃温育进行酶切反应。

注意事项:
已知PNGase F的活性受SDS的抑制,所以在反应混合物中必须加入NP-40。
产品包装:
PNGase F 15,000 U
10×糖蛋白变性缓冲液 1ml
10×ENDOH反应缓冲液 1ml
10% NP40 1ml
质量保证:
无外切糖苷酶污染,无内切糖苷酶F1、F2和F3活 性。无污染的蛋白水解活性。
活性定义:
10μl的反应体系中,37℃条件下,1小时从10μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需的酶量。
贮存条件:
PNGase F:50mM NaCl,20mM Tris-HCl(pH 7.5 储存于25℃),5mM Na2EDTA和50%甘油。保存于-20℃。
For research use ONLY.