SUMO Protease (PE007)

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产品描述:

重组SUMO蛋白酶是通过通过酵母编码的ΜlP1基因,在大肠杆菌中表达,经多次纯化获得。SUMO蛋白酶能够识别并且高效地将SUMO(Small Ubiquitin-Like Modifier)从融合蛋白上切割下来。相对于EK和TEV等蛋白酶的短小识别位点,SUMO蛋白酶能够识别完整的SUMO序列,并依赖于正确的蛋白质构象,所以SUMO蛋白酶不会错切融合的蛋白。SUMO蛋白酶的效力可维持在较宽范围的反应环境体系中,例如温度(4~30℃)、pH(5.5~9.5)等。SUMO蛋白酶还具有多聚His标签,便于融合蛋白切割后的亲和层析纯化。

使用建议:

因为不同蛋白底物,SUMO蛋白酶的酶切效率会有差异,可以在大量酶切前,先小量酶切测试在不同温度下的酶切效率。

应用实例:
SUMO蛋白酶ulp1酶切
图例一)SUMO蛋白酶酶切反应:每个泳道含有15μg的目标蛋白与20 U/mg比例进行SUMO酶切的上样。在室温(25℃)经过不同时间反应后用15%的SDS-PAGE胶检测酶切效果。
每个反应所用酶切时间分别为:
Lane 1: No Sumo蛋白酶
Lane 2: 5 units/mg
Lane 3: 10 units/mg
Lane 4: 20 units/mg
Lane 5: 蛋白Marker
活性定义:
在1×SUMO Protease Buffer(无盐)反应体系中(50mM Tris-HCl,pH 8.0,0.2% Igepal,1 mM DTT),加入1U SUMO Protease及5μg的反应底物(His-SUMO-GFP)补H2O至总体积100μl,25℃条件下反应1小时,酶切效率达90%以上。
质量保证:
经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;本制品不含有非特异性的蛋白酶切活性。
储存条件:
本SUMO蛋白酶的浓度为5,000U/ml。储存于-20℃以下,避免反复冻融,可稳定保存一年以上。
For research use ONLY.