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hrv 3c Protease (PE006)

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产品描述:

重组hrv 3c蛋白酶是通过基因工程表达、纯化后的重组蛋白酶。这种蛋白酶特异识别短肽Leu-Phe-Gln/Gly-Pro中的Gln和Gly残基而进行切割,底物的识别和切割不仅依赖于融合蛋白的一级结构还 依赖于融合蛋白的二级和三级结构。该酶与PreScission Protease相同,在目标蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白(GST)之间由于含有蛋白酶特异识别短肽Leu-Phe-Gln/Gly- Pro,所以能切割插入到PGEX-6P-1、PGEX-6P-2、PGEX-6P-3等带有酶底物识别多肽序列的融合蛋白,把GST和目标蛋白切开。在切割反应过程中,建议先用不同的切割 时间摸索最佳条件,用SDS-PAGE电泳来评估切割程度,完全消化GST融合蛋白3C-Protease的用量,温度和温浴的时间要根据不同的目标蛋白而进行改变,应该在实验过程中优化切割条件。

使用建议:

使用前可通过10μg~20μg蛋白样品预酶切以确定最佳反应条件及酶用量,对于不易酶切的蛋白,可通过增加酶量及延长反应时间的方法获得所需的酶切结果。在切割蛋白时,每切割100μg蛋白需要1U 3C-Protease。在纯化蛋白时,往往每次需要切割10mg以下量的融合蛋白,需要100单位的酶,使用时应注意。

活性定义:

在切割缓冲液(50mM Tris-HCl, 150mM NaCl,1mM EDTA,1mM DTT,pH7.0 25℃中切割100μg被检测的融合蛋白,反应条件为5℃ 16小时,切割率≥90%,定义为一个单位。

质量保证:

经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;本制品不含有非特异性的蛋白酶切活性。

储存条件:

本hrv 3c蛋白酶的浓度为5,000U/ml。储存于-20℃以下,避免反复冻融,可稳定保存一年以上。

For research use ONLY.