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· 蛋白浓度测定试剂盒内容 (250 U)
蛋白标准(2mg/ml BSA)
-20℃
0.5ml×2
BCA-Solution A
室温
100ml
BAS溶液-Solution B
室温
3ml
· BCA蛋白浓度测定试剂盒说明
BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成,实现了蛋白浓度测定的简单,高稳定性,高灵敏度和高兼容性。
· 用 途
蛋白浓度测定。
· 产品特点
快速:检测速度极快,10-20个样品只需不足10分钟即可完成。
简便:只需要一种反应试剂。
灵敏度高:检测浓度下限达到25微克/毫升,最小检测蛋白量达到0.5微克,待测样品体积为1-20微升。
测量范围广: 在50-1000微克/毫升浓度内都有较好的线性关系。
稳定性高:反应后化合物可以稳定存在1小时,不同于其它一些蛋白浓度测定方法(如Lowry法),Bradford法测定蛋
白浓度不受还原剂(如DTT,巯基乙醇)的影响。而且与一系列干扰Lowry,BCA 反应的还原剂(如DTT,巯基乙醇)相容。样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。
· 保存条件
室温保存。蛋白标准配制成溶液后-20℃冻存。
· 使用建议
1) 虽然BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响,但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇低于1mM,b-巯基乙醇低于0.01%。不适用BCA法时建议使用Sinobio生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。若测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化,原因可能是样品中含有严重干扰BCA法测定蛋白浓度的物质。BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质详细的兼容性表,参见BCA蛋白浓度测定兼容性表。
2) 因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应的速度和温度有关,所以除非精确控制显色反应的时间和温度,否则如需精确测定,每次测定都需重做标准曲线。若需得到更为精确的蛋白浓度结果,每个蛋白梯度和样品均需做复孔,。
3) 若温度较低,检测试剂可能出现沉淀,可搅拌或37°C温育使溶解。
4) 当试剂A和B混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失,工作液在密闭情况下可保存1周。
· 使用方法
样品数量较少时可采用分光光度计测定,样品数量较多时采用酶标仪可大大提高检测效率,详细的实验步骤参见欣百诺实验方案。
· 其他说明
