Bradford蛋白浓度测定试剂盒 (PA001)

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产品描述:

Bradford蛋白浓度测定试剂盒 (Bradford Protein Assay Kit) 是根据最常用的两种蛋白浓度检测方法之一Bradford法研制而成(参见实验手册),实现了蛋白浓度测定的快速,稳定和高灵敏度。

产品用途:
蛋白浓度测定。
产品特点:
  • 快速:检测速度极快,10-20个样品只需不足10分钟即可完成
  • 简便:只需要一种反应试剂
  • 灵敏度高:检测浓度下限达到25μg/μl,最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl
  • 测量范围广:在50-1000μg/μl浓度内都有较好的线性关系
  • 抗干扰能力强:Bradford法测定蛋白浓度不受还原剂(如DTT,巯基乙醇)的影响。而且与一系列干扰Lowry,BCA 反应的还原剂(如DTT,巯基乙醇)相容。样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM
使用方法:
样品数量较少时可采用分光光度计测定,样品数量较多时采用酶标仪可大大提高检测效率,详细的实验步骤参见 Novoprotein实验方案。
使用建议:

1) Bradford法对于去污剂敏感,受高浓度去垢剂的影响。需确保SDS低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween-20,60,80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用Novoprotein生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒。Bradford蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质详细的兼容性表,参见Bradford蛋白浓度测定兼容性表。

2) Bradford染色液中考马斯亮蓝易聚集成团,每次使用前请颠倒6~8次并且竖直抓住瓶口做水平圈动作,旋转瓶中液体,帮助充分混匀,但不可以上下振荡混匀。

3) 低温会降低Bradford染色液的敏感度,因此每次使用前应该使Bradford染色液回复到室温,可以倒出每次需要的Bradford染色液,将原瓶放回冰箱,仅仅将需要的Bradford染色液复温,可以减少复温时间。

4) 蛋白标准请在全部溶解后先混匀,再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。标准品曲线配制时,如果吸量不准确或者加样枪不精确会造成标准曲线相关系数减小,可根据需要使用倍比梯度稀释的方法来配制,或者使用精确度高的加样枪。

5) 由于Bradford 法在蛋白浓度增高到一定时候,颜色反应并不成比例增加,因此得到的标准曲线只是在一定范围内可以近似看成直线,每次应按照实际测得的标准曲线计算出相对精确的蛋白浓度。所测蛋白质浓度应确保处于标准曲线线性范围内,否则未知蛋白浓度将出现较大误差。

6) 每次测定蛋白样品时,同时应做新的标准曲线。

7) 反应在5分钟后显色充分,但在10分钟后开始出现沉淀,故建议在加入染色液后5-10分钟内完成检测,误差较小。

8) 如果用玻璃比色杯,可先用甲醇冲洗,然后用洗涤剂清洗,最后用水和丙酮冲洗,或用浓盐酸浸泡过夜,再用水洗净。

产品包装:
试剂盒组成 保存 1000次
蛋白标准(2mg/ml BSA) -20℃ 0.5ml×2
Bradford染色液 4℃ 100ml
保存条件:
G250染色液4℃保存,蛋白标准-20℃保存,本试剂盒自订购之日起九个月内有效。
For research use ONLY.