Cre重组酶 (M021)

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产品描述:

Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子,Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡。loxP识别元件是一34bp序列,其两端是两个13 bp的反向重复序列,中间是起定向作用的8 bp间隔区。重组产物根据loxP位点的位置和相对方向而不同,两个含单loxP位点的DNA将被融合。两个正向重复loxP位点间的DNA将以环状形式切割,而两个反向loxP位点间的DNA序列将被翻转。

本制品是把编码细菌噬菌体P1 Cre蛋白的质粒在大肠杆菌中进行表达后,经多次纯化分离而得到的。

产品用途:
  • 两个loxP位点之间DNA的切割
  • 含loxP位点DNA分子的融合
  • loxP位点之间DNA序列的翻转
使用建议:
建议进行琼脂糖凝胶电泳前,将Cre重组酶反应混合物于70℃温育10分钟。
质量保证:
经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
活性定义:

在50 μl反应体系中,37℃ 30分钟条件下,使0.25 μg的pLox2+对照DNA产生最大位点特异性重 组所需要的酶量定义为一个单位。最大重组可以 通过琼脂糖凝胶电泳分析或通过反应物转化后行 氨苄抗性平板筛选。

反应条件:
1× 反应缓冲液,37℃温育。
热失活:
70℃,10分钟。
For research use ONLY.