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核酸外切酶III (M007)

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产品描述:

核酸外切酶 III能作用于双链DNA,沿3'→5'方向逐步切去单核苷酸。酶与底物的每次结合,只切除最末的几个核苷酸,从而对双链DNA产生渐进缺失。最适底物是平末端或3'凹陷末端DNA,亦可作用于双链DNA的切刻产生单链gap,对于对单链DNA无活性。3'突出末端抗该酶的切割,拮抗程度随3'突出末端的长度而改变,四碱基或更长的突出完全不能被切割。这种特性对于一端是抗性位点(3'突出端)一端是敏感位点(平端或5'突出端)的线性DNA分子,可以产生单向缺失。例如,可将双链DNA用产生不同末端的限制性内切酶双酶切后,利用Exonuclease III的3'→5'的外切酶活性,从一端降解,得到互补的单链 DNA和5'-P单核苷酸。与BAL 31 Nuclease 相比,本酶的碱基特异性较小,如在富含GC的位置上,由于反应停止的机率较低,可用于DNA的Deletion制作。

本制品是把 Exonuclease III基因 (E.coli) 在大肠杆菌中进行表达后,经多次纯化分离而得到的。

使用建议:
核酸外切酶 III不能切割硫代磷酸的桥连。因此,也可以通过引入一个 硫代磷酸核苷酸将DNA分子的一端位点保护起来,再创建单向缺失
质量保证:
经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残 留,无核酸内、外切酶污染。
活性定义:
在37℃30分钟条件下,催化产生1 nmol酸可溶性总脱氧核糖核苷酸所要求的酶量定义为一个活性单位。
热失活:
70℃,20分钟。
For research use ONLY.