热敏性磷酸酶 (M003)

目录 规格 价格
产品描述:
本酶为南极嗜冷菌株TAB5中分离的磷酸酶基因在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。磷酸酶能催化除去DNA或RNA末端的5'磷酸基团。在克隆时将载体DNA用热敏性磷酸酶处理后其片段缺少连接酶所必须的5'磷酸末端,因此载体不能进行自连接,可以大大降低载体自连的背景。
产品用途:
  • 除去载体5'末端的磷酸基团,减少自连背景;
  • 去除PCR产物中残留的dNTP和焦磷酸盐;
  • 除去DNA探针5'末端的磷酸基团,为5'末端磷酸化标记准备最适底物;
  • 蛋白质的去磷酸化。
使用建议:
热敏性磷酸酶在1×HSP Buffer中有最适酶活力。如果要在限制性酶切 Buffer中进行反应,必须在反应体系中添加10×HSP Buffer至1×终浓 度,37℃温育。
产品包装(100次):
组成 体积
热敏性磷酸酶(5U/μl) 40μl
0×HSP Reaction Buffer 1ml
质量保证:
经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
活性定义:
在37℃、30分钟条件下,能使1μg经Hind III(产生5'突出末端)、EcoR V (产生平滑末端)或Pst I (产生5'凹进末端)消化的pUC19 DNA去磷酸化所需的酶量定义为一个单位。
去磷酸化标准是指:在连接反应中能抑制>95%的DNA片段再连接(通过电泳来检测)。
For research use ONLY.