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T4多聚核苷酸激酶 (M002)

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产品描述:
  • 该酶能够催化磷酸在γ-位和双链/单链DNA或RNA的5´-羟基末端以 及3´-单磷酸核苷间进行转移和交换:5´-OH + NTP 5´-P + NDP;
  • 该酶还具有3´磷酸酶活性,将3´-磷酸基团从寡核苷酸的3´磷酸 末端、脱氧3´-单磷酸核苷和脱氧3´-二磷酸核苷上水解掉。
产品用途:
  • 引物或PCR产物的5´末端磷酸化以便进行连接反应。(参见实验方案)
  • 合成DNA接头 (Linker) 的5´末端磷酸化以便进行连接反应。
  • DNA及RNA 5´末端的标记,用作寡核苷酸探针。
使用建议:
  • 1×T4 PNK反应缓冲液中不含ATP,需在反应体系中加入终浓度为1mM的ATP,也可以使用T4 DNA连接酶的反应液代替。
  • 铵离子强烈抑制T4 PNK活性,故DNA应溶于不含铵盐的溶液中。
  • 请参考常用分子生物学实验手册。
产品包装:
组成 体积
T4 PNK (10U/μl) 20μl
10×T4 PNK Reaction Buffer 1ml
10mM ATP 50μl
质量保证:
经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
活性定义:
以Micrococcal Nuclease处理的小牛胸腺DNA为底物,在37℃,pH7.6的条件下,30分钟内使1 nmol 的[γ-32P]ATP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
For research use ONLY.