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Taq DNA Ligase (M024)

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产品描述:

本酶是从Thermus aquaticus HB8中克隆出的DNA连接酶,利用基因重组技术,在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。Taq DNA连接酶能够催化磷酸二酯键的形成,使杂交到同一互补靶DNA链上的两条契合寡核苷酸链的5´-磷酸末端和3´-羟基末端通过磷酸二酯键连接。这个连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶DNA完全配对并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。在 45℃-65℃ 范围内,Taq DNA连接酶均有活性。

反应条件:

1×Taq DNA连接酶反应缓冲液[20mM Tris-HCl(pH7.6 储存于25℃),25mM KAc,10mM Mg(Ac)2,10mM DTT,1mM NAD和0.1% Triton X-100],45℃ 温育。

本酶需NAD+作辅因子,NAD+已被添加在10× Taq DNA连接酶缓冲液中;为了延长NAD+的半衰期,缓冲液应于-70℃贮存。

产品包装:
组成 体积
Taq DNA Ligase(40U/μl) 50μl
10×Reaction Buffer for Taq Ligase 1ml
质量保证:
经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带,严格质量控制,确保该产品具有最高的活性和纯度。
活性定义:
50μl反应体系中,45℃ 反应条件下,15分钟能使 50% 的12 bp 粘性末端片段发生连接所需要的酶量。12 bp粘性末端来自于BstEII消化1 μg λDNA。
For research use ONLY.