Cas9核酸内切酶 (E365)

目录 规格 价格
E365-01A 50U 1286
产品描述:

CRISPR/Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。CRISPR/Cas9 系统通过将入侵噬菌体和质粒 DNA 的片段整合到 CRISPR 序列中,并利用相应的 CRISPR RNAs(crRNAs)来指导Cas9蛋白对同源序列的降解,从而提供免疫性。人工改造过的Cas9/sgRNA系统通过sgRNA(short guide RNA)引导Cas9蛋白识别并剪切带有sgRNA靶点的双链DNA,可用于基因敲除和精确编辑DNA等操作。

产品特点:

纯蛋白体系,避免CRISPR基因敲除时引入质粒或病毒干扰

产品用途:
  • 基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲除
  • 基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲入
  • sgRNA剪切靶点DNA的效率检测,降低体内筛选成本
  • 体外剪切靶DNA的特异位点
应用实例:
图例一)Cas9核酸内切酶 DNA片段切割活性检测。
带有靶位点的DNA片段:6100bp;酶切后的片段:3900bp和2200bp。
相关产品
产品 目录号
Cas9 sgRNA互补链切口酶 (nickase) E366
Cas9 sgRNA非互补链切口酶 (nickase) E367
Cas9 突变失活酶 E368
sgRNA体外转录试剂盒 E369
sgRNA体外筛选试剂盒 E370

保存条件:

-20℃保存,或-80℃长期保存。
产品组成
组分 体积
Cas9核酸内切酶(1U/μL) 50μL
10×Reaction Buffer 500μL
活性定义
37°C,在sgRNA足量的20μL反应体系中,1h完全切割1μg质粒或线性化DNA所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量保证:

经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留;无核酸内、外切酶污染;无RNase污染。

体外切割体系(20μl)

组分 体积
dsDNA 200nM
sgRNA 100nM
Cas9 酶 1U
10×Reaction Buffer 2μL
RNase Free Water To 20μL
37°C反应1h,琼脂糖胶电泳检测
*可在反应体系中添加20U的RNase Inhibitor,防止dsDNA不纯导致sgRNA的降解。
参考文献

  • Dang Y, Jia G, Choi J, et al.
    Optimizing sgRNA structure to improve CRISPR-Cas9 knockout efficiency.
    Genome biology(2015)
For research use ONLY.