NovoAmp全基因组扩增试剂盒 (E129)

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产品描述:

全基因组扩增试剂盒基于多重链置换扩增的Phi29 DNA聚合酶等温扩增体系,Phi29 DNA聚合酶是从Bacillus subtilis噬菌体Phi29中克隆出的嗜温DNA聚合酶,利用基因重组技术,在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。Phi29 DNA聚合酶具有很强的链置换活性,可实现对DNA复杂结构的解链与复制。同时具有高效的DNA合成能力,可连续合成多达70kb的DNA片段。Phi29 DNA聚合酶具有很强的3’→5’外切酶活性,保真度高于绝大多数高保真酶,因此Phi29 DNA聚合酶特别适合用于全基因组扩增。

本试剂盒可以实现少量DNA样本的全基因组无差别扩增,一个反应可以达到40ug的全基因组DNA。本试剂盒要求DNA样品不能严重降解,以减少因模板量太少造成不平衡扩增。扩增产物可以稀释后用于后续的DNA分析。

产品特点:
  • 高覆盖度:经过扩增后可达到95%以上覆盖度。
  • 高均一度:无偏好扩增,可实现全基因组的均一扩增。
  • 高保真:具有很强的校正功能,保真度高。
  • 灵敏:可实现极少量样本的全基因组扩增。
实验方案:
1.配制以下反应体系:
组成体积
10×NovoAmp Buffer 5ul
Primer mixture(1mM)1.25ul
模板1ul
加ddH2O至45ul
2. 95℃预变性3min,然后冰上冷却
3. 加入以下成分
组成体积
dNTPs(各10mM)2.5μl
100x BSA0.5μl
NovoAmpPhi29 Enzyme2.5μl
4. 30℃反应3h或者过夜。
5.扩增产物是高浓度基因组DNA,需要将扩增产物用无菌水或者TE缓冲液进行稀释后进行下游实验。
产品包装:
组成体积
10×NovoAmpBuffer1ml
Primer mixture(1mM)20ul
dNTPs(10mM)200ul
100×BSA100ul
NovoAmpPhi29 Enzyme25ul
ddH2O1ml
质量保证:
出厂前经模拟扩增验证;无核酸内、外切酶污染。
For research use ONLY.