HaemoTaq血液耐受DNA聚合酶 (E038)

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产品描述:

Haemo Taq是截短后的Taq DNA聚合酶,它缺失了5'-3'外切酶活性。HaemoTaq还有其它突变,这些突变使它能够耐受全血中存在的抑制剂。此酶能够扩增人和小鼠全血样品中的DNA而无需事先提纯。HaemoTaq可耐受高达体系中10%的全血。在大多数抗凝剂存在下Haemo Taq依然表现良好,包括肝素、柠檬酸和EDTA。

产品特点:
  • 简便:直接用血液为模板扩增目的基因,无需事先提纯(图例一)。
  • 高效:有效减少了杂带产生,从而实现高特异性的PCR。
  • 稳定:经测试,反复冻融40 次后,扩增性能仍不受影响。
产品用途:
  • 直接用血液为模板进行PCR 扩增目的基因,可进行血液相关基因疾病的快速诊断;
  • 基因组扩增检测;
使用建议:
  • 建议使用时添加≤10%的全血为模板,加上血液后建议用涡旋器将管中各组分轻轻混匀。
应用实例:
HaemoTaq DNA Polymerase Amplification
图例一)以人全血为模板扩增目的基因。
1-4:HaemoTaq; 5-8:普通Taq;
泳道1,5:10%血液+Na2EDTA;
泳道2,6:10%血液+K2EDTA;
泳道3,7:10%血液+肝素钠;
泳道4,8:10%血液+肝素钾;
M:DL2000 Marker;

产品包装:

HaemoTaq DNA 聚合酶 (2U/μl)100次
dNTP混合液(各10mM)*200μl
5×HaemoTaq Buffer with Mg2ml

质量保证:

经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。

活性定义:

在74℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

常用反应体系(25μl)
5×HaemoTaq Buffer5μl
上游引物0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物0.2-1.0μM(终浓度)
dNTP(各10mM)1.0μl
全血模板1-50ng(质粒)
10ng-1μg(基因组)
HaemoTaq1μl
ddH2O至50μl

常用PCR循环:

当扩增片段<3K:
94 C 1分钟30秒
30次循环94℃,20秒
55℃ 20秒/
72℃ 60秒/kb
72℃5分钟
4℃保温
For research use ONLY.