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HotStart SuperTaq DNA 聚合酶 (E019)

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产品描述:
本制品是SuperTaq经化学修饰处理后的制品。经处理后的Taq 酶在加热至高温前,其聚合酶活性被抑制,从而抑制低温条件下由 引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。Hot Start SuperTaq DNA聚合酶在PCR反应最初的DNA变性时间延长到10分钟即可 恢复活性。本制品适用于高特异性PCR反应、Mutiplex PCR、高GC含 量(>60%),有二级结构等有较强背景的基因组扩增和大规模基因组 扩增检测。与普通的热启动Taq酶相比,本品具有延伸时间更短,产量更高,保真性比普通Taq提高了一倍。
产品特点:
  • 简便:与目前最有效的热启动酶条件一致,无需改变实验条件。
  • 快速:扩增速度为普通Taq的4倍,72℃时10-15s可延伸1kb以 上。
  • 高效:有效减少了杂带及拖带产生,从而实现高特异性的PCR。
  • 高灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
产品用途:
  • 高特异性PCR反应;
  • 复杂模板扩增;
  • Multiplex PCR;
  • 基因组扩增检测;
  • 荧光定量PCR;
应用实例:
Taq DNA Polymerase Amplification
图 例 一 ) 使用 HotStart SuperTaq DNA 聚合酶进行的荧光定量PCR。

产品包装:

组成体积
HotStart SuperTaq 聚合酶(5U/μl)50μl
dNTP混合液(各10mM)*200μl
10×HotStart SuperTaq Buffer with Mg2+2ml
*E019-02系列不含dNTP混合液

质量保证:

经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单 一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残 留,无核酸内、外切酶污染。

活性定义:

在74℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

活性定义:

在74℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

常用反应体系(50μl)

10× HotStart SuperTaq Buffer5μl
上游引物0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物0.2-1.0μM(终浓度)
dNTP(各10mM)1.0μl
模板1-50ng(质粒)
10ng-1μg(基因组)
HotStart SuperTaq0.25μl(1.25U)
ddH2O至50μl
*Mg2+终浓度为2mM

常用PCR循环:

当扩增片段<3K:
94℃ 10分钟
30次循环94℃,20秒
57℃ 20秒
72℃ 根据产物长度调整, 15秒/kb
72℃3分钟
4℃保温
当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
94℃10分钟
30次循环 94℃,5秒
68℃ 根据产物长度调整, 15秒/kb
72℃3分钟
4℃保温
For research use ONLY.