SuperTaq DNA 聚合酶 (E030)

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产品描述:
Novoprotein采用分子进化技术在普通Taq酶基础上进行改造、制备的新型聚合酶SuperTaq酶具有快速、高灵敏度、抗干扰能力强等特点,是新一代的PCR聚合酶。使用SuperTaq能获得更理想的扩增结果,并大幅度缩短扩增反应时间。
产品特点:
  • 快速:SuperTaq扩增速度为普通Taq酶的4倍,72oC保温10-15秒可延伸1kb以上。
  • 高效:以λDNA为模板,扩增长度可达8kb,能高效扩增≤6kb片段;对于人基因组DNA等复杂模板,能有效扩增出3kb特定基因片段(图例一)。
  • 高灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出1.2kb特定基因片段(图例二)。在同样条件下对于基因组DNA的扩增显著优于Taq酶。
  • 独特配方的5×Buffer:使PCR扩增反应更加稳定、灵敏、高效。
产品用途:
  • 常规PCR鉴定;
  • 小片段目标基因克隆;
  • 基因组片段扩增;
  • 平端PCR产物加A;
  • 双脱氧法测序;
  • 荧光定量PCR;
使用建议:

使用本试剂扩增得到的PCR产物3´ 端有一突出"A"碱基,可直接克隆于T载体中。

由于SuperTaq酶的准确度低于Pfu/Fast Pfu聚合酶,如需扩增克隆较长片段建议换用Pfu/Fast Pfu酶。当扩增大片段时,SuperTaq酶的扩增效率低于SuperTaq Plus酶,在扩增大片段时建 议换用SuperTaq Plus酶。

应用实例:
superTaq DNA Polymerase Amplification
图例一)50μl扩增体系中,以50ng 人基因组DNA为模板,对3kb片段的扩增结果。
泳道M:1KB DNA Marker; 泳道1:泳道2:扩增3kb片段结果;
superTaq DNA Polymerase Amplification
图例二)50μl扩增体系中,分别以50ng~0.05ng人基因组DNA为模板,可对特定基因片段(1.2kb)进行很好的扩增。
泳道1:50ng;泳道2:5ng; 泳道3:0.5ng;泳道4:0.05ng; 泳道M:DNA Ladder 2000;

产品包装:

组成体积
SuperTaq DNA 聚合酶(5U/μl)50μl
dNTP混合液(各10mM)*200μl
5×SuperTaq Buffer with Mg2+2ml
*E030-02系列不含dNTP混合液

质量保证:

经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带。PCR方法检测无大肠杆菌DNA残 留、无核酸内、外切酶污染。

活性定义:

在74℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTP的 掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

常用反应体系(50μl)

5×SuperTaq Buffer*10μl
上游引物0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物0.2-1.0μM(终浓度)
dNTP(各10mM)1.0μl
模板1-50ng(质粒)
10ng-1μg(基因组)
SuperTaq0.25μl(1.25U)
ddH2O至50μl
*Mg2+终浓度为2mM

常用PCR循环:

当扩增片段<3K:
94℃ 10分钟
30次循环94℃,20秒
57℃ 20秒
72℃ 根据产物长度调整, 15秒/kb
72℃3分钟
4℃保温
当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
94℃10分钟
30次循环 94℃,5秒
68℃ 根据产物长度调整, 15秒/kb
72℃5分钟
4℃保温
For research use ONLY.