Super Taq Plus DNA 聚合酶 (E032)

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产品描述:
SuperTaq Plus DNA聚合酶是SuperTaq DNA聚合酶和Fast Pfu DNA聚合酶按特定比例混合而成。SuperTaq Plus DNA聚合酶具有 SuperTaq DNA聚合酶所有的特点:扩增快速、高灵敏度、抗干扰能力强等,同时由于Fast Pfu 酶的存在,具有一定的保真特性, 能部分纠正DNA扩增过程中所出现的错误。与SuperTaq DNA聚合酶相比,具有扩 增长度增加(简单模板扩增长度可达30kb,复杂模板可有效扩增10kb), 保真度好的特点;与Fast Pfu DNA聚合酶相比,具有扩增速度更快,扩增灵敏度更高的优点。
产品用途:
  • 可替代大部分SuperTaq DNA聚合酶的用途;
  • 需高灵敏度的PCR扩增;
  • 大片段PCR扩增反应 (可达30kb)。
使用建议:
使用本制品扩增得到的PCR产物具有3´端"A"突出,可直接克隆于T载体中。
应用实例:
Super Taq plus DNA Polymerase Amplification
图例一) 50μl扩增体系中,分别以100ng~0.1ng小鼠基因组DNA为模板,可很好地扩增出1.1kb DNA片段(IL-1b基因)。
泳道M:DNA Ladder 2000
泳道1:100ng; 泳道2:10ng; 泳道3:1ng; 泳道4:0.1ng;

产品包装:

组成体积
SuperTaq Plus 酶 (5U/μl)50μl
dNTP混合液(各10mM)*200μl
5×SuperTaq Plus Buffer with Mg2+2ml
*E031-02系列不含dNTP混合液

质量保证:

经多次柱纯化,SDS-PAGE检测纯度大于95%;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。

活性定义:

在74℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

常用反应体系(50μl)

组分体积
5× SuperTaq Plus Buffer10μl
上游引物0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物0.2-1.0μM(终浓度)
dNTP(各10mM)1.0μl
模板1-50ng(质粒)
10ng-1μg(基因组)
SuperTaq Plus酶0.25μl(1.25U)
ddH2O至50μl
*Mg2+终浓度为1.5mM

常用PCR循环:

当扩增片段<3K:
94℃1分钟30秒
30次循环94℃,30秒
57℃ 30秒
72℃ 根据产物长度调整, 15秒/kb
72℃3分钟
4℃保温
当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
94℃1分钟30秒
30次循环 94℃,5秒
68℃ 根据产物长度调整, 15秒/kb
72℃3分钟
4℃保温
For research use ONLY.