2x HaemoTaq Master Mix (E067)

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产品描述:
Haemo Taq是截短后的Taq DNA聚合酶,它缺失了5'-3'外切酶活性。Haemo Taq还有其它突变,这些突变使它能够耐受全血中存在的抑制剂。此酶能够扩增人和小鼠全血样品中的DNA而无需事先提纯。Haemo Taq可耐受高达体系中10%的全血。在大多数抗凝剂存在下Haemo Taq依然表现良好,包括肝素、柠檬酸和EDTA。本制品是将PCR反应所需的Haemo Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物,专为常规PCR扩增反应优化。使用时只需再加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程的污染。2X Haemo Taq Master mix提供普通型/快速上样型两种形式供您选择。经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。
产品特点:
  • 简便:直接用血液为模板扩增目的基因,无需事先提纯(图例一)。
  • 高效:有效减少了杂带产生,从而实现高特异性的PCR。
  • 稳定:经测试,反复冻融40 次后,扩增性能仍不受影响。
产品用途:
  • 直接用血液为模板进行PCR 扩增目的基因,可进行血液相关基因疾病的快速诊断;
  • 基因组扩增检测;
使用建议:
  • 建议使用时添加≤10%的全血为模板,加上血液后建议用涡旋器将管中各组分轻轻混匀。
应用实例:
2x HaemoTaq MasterMix PCR
图例一)以人全血(EDTA 抗凝)为模板,加入不同血液量扩增
泳道1:10%全血
泳道2:5%全血
泳道3:2%全血
泳道4:0%全血
泳道M:DL2000 Marker

产品包装:

2×Blood HaemoTaq Master Mix100次

质量保证:

经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。

活性定义:

在74℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

常用反应体系(50μl)
2× HaemoTaq Master Mix 12.5μl
上游引物 0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物 0.2-1.0μM(终浓度)
全血 0.1-2.5ul
ddH2O 至25μl
*Mg2+终浓度为3.75mM

常用PCR循环:

当扩增片段<3K:
94 C 1分钟30秒
30次循环94℃,20秒
55℃ 20秒/
72℃ 60秒/kb
72℃5分钟
4℃保温
For research use ONLY.