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超敏基因组PCR扩增检测试剂盒 (E008)

目录 规格 价格
产品描述:

本制品是将 genotyping PCR反应所需的全部试剂、dNTP及PCR增强剂,为预先配制成2倍浓度的混合物。

2×genotyping Taq Master Mix专为常规PCR快速扩增及基因组 DNA等复杂模板快速PCR扩增检测设计优化。本产品使用方便快捷,使用时只需加入引物及模板并加入去离子水稀释至1×即可进行反应。

2×genotyping Taq Master Mix提供普通型/快速上样型两种形式供您选择,经测试,染料的加入不影响扩增性能,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。

产品用途:

本品适用于从复杂背景中扩增微量模板DNA。由于Genotyping PCR的突变率高于普通PCR反应,故其产物不推荐用于需高保真的基因克隆。

Genotyping PCR所用引物需精心设计,否则会扩增出较多杂带(参见PCR引物设计的黄金法则)。

应用实例:
超敏GenoTyping试剂盒
超敏genotyping检测试剂盒
扩增灵敏度检测对比:2×Taq Master Mix(上图) vs 2×genotyping Taq Master Mix(下图)

用浓度为100ng/μl的人基因组DNA将浓度1ng/μl含LacZ基因的质粒梯度稀释至一下浓度梯度:0.1ng/μl、0.01ng/μl、1pg/μl、0.1pg/μl、0.01pg/μl、1fg/μl 从每个浓度梯度中各取1μl作为扩增模板,分别用2×Taq Master Mix 及2×genotyping Taq Master Mix 对LacZ基因进行扩增(都分别进行40轮PCR扩增循环)。

结果显示:2×genotyping Taq Master Mix检测灵敏度比 2×Taq Master Mix高1,000倍以上。 泳道M:DNA Ladder 2000; 泳道1~6:分别对应以上各模板浓度梯度

产品包装:
组成体积
2×GT PCR Reaction Mix1ml
Taq酶30μl
超敏基因组PCR扩增反应体系:
组分体积
2×Reaction Mix* 10μl
上游引物0.05uM(终浓度)
下游引物0.05uM(终浓度)
模板DNA 1-3ul DNA样品
Taq酶(5U/μl)0.25μl
ddH2O至20μl
*反应体系可成比例调整至50μl等体积
超敏基因组PCR扩增PCR程序:
93℃,1分钟30秒
40次循环93℃,30秒
57℃,30秒(57℃适用于大多数反应,亦可在55-60℃调整)
65℃,按产物长度60秒/1KB计算
4℃保温
For research use ONLY.