PCR 优化试剂盒 (E040)

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产品描述:
影响PCR反应的因素很多,如聚合酶本身的性质,pH值,酶保护剂,助溶剂等,只有在这些因素都是最适的情况下才能获得较好的扩增产物。本试剂盒为您提供了8 种耐热聚合酶和相应的精心配制的缓 冲液,其中缓冲液的pH值,盐离子浓度和助溶剂成分等各不相同,当扩增某些复杂的基因模板等出现问题时,应测试不同的聚合酶及反应缓冲体系。另外,本试剂盒还提供了PCR增强剂,能增加引物的特异性,提高DNA聚合酶的热稳定性,适应较宽范围的退火温度和Mg2+浓 度。可以在试剂盒提供的8种聚合酶及相应反应体系的基础上再添加PCR增强剂,以找到PCR最适反应体系从而达到最佳的PCR反应效果。
产品包装:
Taq DNA 聚合酶(5U/μl) 20μl
5×Taq Buffer with Mg2+ 1ml
SuperTaq DNA 聚合酶 (5U/μl) 20μl
5×SuperTaq Buffer with Mg2+ 1 ml
Taq Plus DNA 聚合酶 (5U/μl) 20μl
5×Taq Plus Buffer with Mg2+ 1 ml
SuperTaq Plus酶 (5U/μl) 20μl
5×SuperTaq Plus Buffer with Mg2+ 1 ml
Pfu DNA 聚合酶 (5U/μl) 20μl
10×Pfu Buffer with Mg2+ 1 ml
Fast Pfu DNA 聚合酶 (5U/μl) 20μl
5×Fast Pfu Buffer with Mg2+ 1 ml
2×Hot Start Taq Master Mix 500μl
2×Hot Start Taq Plus Master Mix 500μl
PCR 增强剂I 200μl
PCR 增强剂II 200μl
各种 Novoprotein PCR聚合酶的反应速度
PCR聚合酶 反应速度
Taq DNA 聚合酶 1kb/60秒
SuperTaq DNA 聚合酶 4kb/60秒
Taq Plus DNA 聚合酶 1kb/60秒
SuperTaq Plus酶 4kb/60秒
Pfu DNA 聚合酶 0.5kb/60秒
Fast Pfu DNA 聚合酶 2kb/60秒
Hot Start Taq DNA 聚合酶 1kb/60秒
Hot Start Taq Plus DNA 聚合酶 1kb/60秒
常用反应体系(50ul)
组分 体积
5×Buffer 10μl
上游引物 0.05uM(终浓度)
下游引物 0.05uM(终浓度)
dNTP(各10mM) 1.0μl
模板 1-50ng(质粒)
10ng-1ug(基因组)
PCR聚合酶 0.25μl(1.25U)
ddH2O 至50μl
常用PCR循环:
当扩增片段<3K:
94℃ 1分钟30秒
30次循环 94℃,20秒
57℃ 20秒
72℃ 根据产物长度调整, 各种聚合酶的扩增速度见上面表格
72℃ 5分钟
4℃ 保温
当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
94℃ 1分钟30秒
30次循环 94℃,5秒
68℃ 根据产物长度调整, 各种聚合酶的扩增速度见上面表格
72℃ 5分钟
4℃ 保温
* Hot start Taq DNA聚合酶和Hot start Taq Plus DNA聚合酶预变性条件为94oC,10分钟
For research use ONLY.