2×Specific Taq Master Mix (E010)

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产品描述:

本制品是由Taq DNA 聚合酶、dNTP混合物、MgCl2以及反应缓冲液 预先配制成2倍浓度的混合物,是E005 2×Taq Master Mix同一系列 产品,其配方专门针对复杂模板扩增条件进行优化,具有更好的稳定 性,更好的扩增特异性,可减少非特异性条带的扩增,能提高复杂模 板及高GC含量模板的扩增效果。使用时,只需在加入模板和引物并稀 释到1倍浓度即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操 作过程中的污染。2×SpecificTM Taq Master Mix提供普通型/快速上 样型(含蓝色染料)两种形式供您选择。经测试,高纯度染料的加入 不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。

产品特点:
  • 高效:以DNA为模板,扩增长度可达8kb,能高效扩增4kb以下片 段。
  • 稳定:反复冻融五十次,4℃放置30天,室温放置一周后,扩增性能不受影响。
  • 快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应 体系配制。
  • 便利:10μl, 25μl 或50μl体系全部适用。PCR反应后可直接电泳(含染料形式)。
产品用途:
  • 适用于常规PCR鉴定及较短DNA片段的PCR克隆;
  • 复杂模板扩增,高GC含量模板扩增;
  • 平端PCR产物加A。
使用建议:
使用本制品扩增得到的PCR产物具有3´端"A"突出,可直接克隆于T载体 中;1.PCR前引物进行5´端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中:
PCR的反应液请在冰中配制,然后置于PCR反应仪上进行PCR反应;如需较高灵敏度的PCR反应可选择2×Taq Master Mix(目录号: E005)。如实验室长期需要对同一片段进行扩增,建议采用防污染PCR扩增检测2×Master Mix(目录号:E061),以避免PCR产物的气溶胶污染。
应用实例:
Taq DNA Polymerase Amplification
图例一)在50μl扩增体系中,分别以人基因组DNA为模板,对特定基因片段 (1000bp) 进行扩增。
泳道1,2:2× SpecificTM Taq Master Mix;泳道3,4:A公司的Taq预混液;泳道M:DNA Ladder 2000

产品包装(A包装):

组成体积
2×SpecificTM Taq Master Mix1ml×3支

常用反应体系(50μl)

组分体积
2×Master Mix*25μl
上游引物0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物0.2-1.0μM(终浓度)
模板1-50ng(质粒)
10ng-1μg(基因组)
ddH2O至50μl
*Mg2+终浓度为2mM

常用PCR循环:

当扩增片段<3K:
94 C 1分钟30秒
30次循环94℃,20秒/57℃,20秒/72℃,根据产物长度调整, 60秒/kb
72℃5分钟
4℃保温
当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
94 C20秒
30次循环 94℃,5秒/68℃,根据产物长度调整, 60秒/kb
72℃5分钟
4℃保温
For research use ONLY.