2×Taq Plus Master Mix (E007)

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产品描述:

本制品是将PCR反应所需的Taq Plus DNA 聚合酶、dNTP混合物、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。2×Taq Plus Master Mix专为DNA大片段PCR扩增反应优化,扩增长度增加,保真度 好,扩增速度快,反应效率高,适合于扩增1–20kb长度的片段。使用时,只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,大大 地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。使用本制品扩增得 到的PCR产物具有3´端"A"突出,因此可直接克隆于T-vector中。

2×Taq Plus Master Mix提供普通型/快速上样型两种形式供您 选择。经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接 电泳,节省时间。

产品特点:
  • 更高效:以 DNA为模板,扩增长度可达20kb。
  • 更灵敏:比Taq酶扩增灵敏度更高(图例一)。
  • 稳定:反复冻融几十次,4℃放置30天,室温放置一周后, 扩增性能不受影响。
  • 快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
  • 便利:10μl, 25μl 或50μl体系全部适用。PCR反应后可直接电 泳(含染料形式)。
产品用途:
  • 可替代大部分2×Taq Master Mix的用途;
  • 需高灵敏度的PCR扩增;
  • 大片段PCR扩增反应 (可达 30kb)。
使用建议:
使用本制品扩增得到的PCR产物具有3´端"A"突出,可直接克隆于 T-vector中。
应用实例:
Taq DNA Polymerase Amplification
图例一) 50μl扩增体系中,分别以100ng~0.1ng小鼠基因组DNA为模板,可很好地扩增出1.1kb DNA片段(IL-1b 基因)。
泳道M:DNA 2000 Ladder 泳道1:100ng; 泳道2:10ng; 泳道3:1ng; 泳道4:0.1ng;

产品包装(A包装):

组成体积
2xTaq Plus Master Mix1ml×3支

常用反应体系(50μl)

组分体积
2×Master Mix*25μl
上游引物0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物0.2-1.0μM(终浓度)
模板1-50ng(质粒)
10ng-1μg(基因组)
ddH2O至50μl
*Mg2+终浓度为2mM

常用PCR循环:

当扩增片段<3K:
94 C 1分钟30秒
30次循环94℃,20秒/57℃,20秒/72℃,根据产物长度调整, 60秒/kb
72℃5分钟
4℃保温
当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
94 C20秒
30次循环 94℃,5秒/68℃,根据产物长度调整, 60秒/kb
72℃5分钟
4℃保温
For research use ONLY.