T7 RNA Polymerase (E121)

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产品描述:

本酶是噬菌体T7 DNA 编码的酶,以含有T7 启动子序列的双链DNA 为模板,以NTP 为底物,合成与启动子下游的单链DNA 互补的RNA。本酶对T7 启动子序列具有高度特异性,不能识别其它生物来源的启动子。

产品用途:
  • 合成单链RNA
  • 合成高特异性RNA探针
  • 合成siRNA前体
  • 制作RNA剪接反应(RNA splicing)的前体。
  • 以帽类似物(Cap analog)为引物,制作Capped mRNA
使用建议:
  • 为了特定区域的有效转录,建议在其区域下游把模板DNA 预先切成平端或5′突出末端。
  • 缓冲液中的亚精胺与核酸结合可能形成不溶物,建议最后加入模板DNA。
常用反应体系(50μl):
组分体积
5X Transcription buffer10μl
ATP/GTP/CTP/UTP Mix, 10μl
10 mM each(终浓度为2 mM )
线性化的模板DNA1μg
RNase Inhibitor(40U/μl)1.25μl
T7 RNA Polymerase(20U/μl)1.5μl
DEPC 水补足到50μl
37℃反应2 小时。
产品包装:
产品组成体积
T7 RNA Polymerase(20U/μl)250μl 
5×Transcription Buffer1ml×2
质量保证:
经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DN A残留,无RNA聚合酶,无DNase和RNase污染。
活性定义:
在37℃、pH8.0 的条件下,1小时内使1nmol的 [3H] GMP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
For research use ONLY.