Easy Cloning T-vector(pEC-T) (T003)

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产品描述:

Easy Clone T-vector是一种PCR产物高效TA克隆的专用T载体。 它由pBluescript II KS载体改造而成:保留了pBluescript II KS载 体全部的酶切位点;PCR产物插入位点处于多克隆酶切位点的中间,其两侧都有众多的酶切位点可供选择。由于本载体以pBluescript II KS 载体为基础构建而成,所以它具有同pBluescript II KS载体相同的功能:PCR产物插入后可以利用a-互补性进行蓝白斑筛选,挑选阳性克隆。可以用M13通用引物和T7,T3启动子引物对PCR产物进行测序。含有T7及T3 RNA聚合酶的启动子,可以对插入片段进行体外转录。

产品特点:
15分钟快速连接:
  • 随酶提供独特配方的2×快速及10×普通T4 DNA Ligation Buffer。
  • 使用2×快速Buffer在室温(25℃)下,仅需15分钟即可完成连接反应。
自带超快PCR鉴定2×Fast Taq Master Mix及DNA Marker:

2×Fast Taq Master Mix (Quick Load型)已含有PCR反应所需的快速型PCR聚合 酶、dNTP混合物、MgCl2、上样染料以及反应缓冲液预先,使用时只需再加入 模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应。其扩增速度为普通Taq酶的数 倍,因此可大幅度缩短PCR鉴定过程所需要的时间, 试剂盒自带预混1×Loading Buffer的DNA Ladder 2000 Plus,能满足绝大部分PCR产物电泳的需要。

pEC-T-map
f1(+) origin135-441
LacZ alpha fragment451-832
Multiple cloning site653-776
pUC origin1174-1841
Amp resistance1992-2849
pEC-T MCS
产品组成(20次):
pEC-T vector(25 ng/μl)100μl
T4 DNA Ligase30ul
2×Quick Ligation Buffer500ul
10×Ligation Buffer500ul
Control Insert(50 ng/μl)10ul

附赠:
2×Taq Master Mix (快速上样型)1ml×2
2×Fast Taq Master Mix (快速上样型)1ml
DNA Ladder 2000 Plus100ul
质量控制:
Control Insert克隆后的白色菌落中,有90%以上 含有Insert DNA片段。
Control Insert经克隆后,经测序确认“T”突出的存在。
参考文献

  • Y Chu, J Pan, A Wu, R Cai, H Chen.
    Molecular cloning and functional characterization of dihydroflavonol-4-reductase gene from Calibrachoa hybrida ..
     Scientia Horticulturae(2014)
For research use ONLY.