pNovoTrx-EK (V101)

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产品描述:

本质粒以Nco I线性化方式提供,请配合NovoRec®PCR产物一步无缝克隆试剂盒使用(CatNo. NR001)。

Trx是实验室中最常用的融合标签之一,能够促进目标蛋白质的溶解性和正确折叠。在需要用肠激酶(Enterokinase, CatNo. PE001)切除的时候,由于S Tag中存在非特异性降解位点,酶切条件难以控制,常出现两条标签带(17KD,14KD),pNovoTrx通过删除部分氨基酸序列,在保留原有Trx融合蛋白质优势的同时,避免了非特异性酶切,使酶切结果的判断和目标蛋白质的分离变的更加方便。在不希望使用肠激酶切割时,也可通过KpnI或BglII位点引入Tev或其他蛋白酶切割位点。

目的基因扩增按常规方法设计引物后,在5´端引物前添加以下序列:GAC GAT GAT GAC AAG; 3´端引物前添加:TTC GGA TCC GAT ATC。注意:5´端引物从第一个氨基酸不能为Pro。不希望目标蛋白C端保留His Tag时,3´端引物需要加入终止密码子。

pNovoTrx-EK Expression plasmid
图示左:经典Trx标签,不同用量的 EK酶切后标签被非特异酶切为两个片段(过量酶切会产生多个片段,未示),右图为NovoTrx-EK,酶切后显示单一的标签。
pNovoTrx-EK Expression plasmid
T7 promoter686 -702
LacO659-683
Trx Tag123 -614
Enterokinase site219-233
T7 Terminator26 -72
F1 origin5356- 5811
Amp resistance4367- 5224
ColE1 Ori3546 -4219
lacI CDS1093 – 2172
pNovoTrx-Tev expression plasmid MCS
产品组成:
组分体积
pNovoTrx-EK1ug
NovoRec®重组酶20μl
10×NovoRec®重组缓冲液50μl
Control Insert(50 ng/μl)10μl

附赠:
2×pfu Master Mix (快速上样型)1ml
2×Fast Taq Master Mix(快速上样型)1ml
DNA Ladder 2000 Plus100μl
质量控制:
pNovoTrx-EK线性化载体经过严格的自连测试以及连接效率测试。
载体序列见www.sinobio.net.
For research use ONLY.